CẬP NHẬT USP 1788

Vào tháng 5 năm 2021, một bước tiến quan trọng đã được thực hiện trong việc cập nhật USP<1788>, với việc xuất bản Phương pháp Xác định Hạt Tiểu Phân Không Nhìn Thấy. Sự điều chỉnh này nhằm mục đích tăng cường sự rõ ràng và hỗ trợ thông tin trong các chương <788> về Hạt Tiểu Phân trong Tiêm, <789> Hạt Tiểu Phân trong Dung Dịch Nhỏ Mắt, và <787> Hạt Tiểu Phân Không Nhìn Thấy trong Tiêm Protein Điều Trị. Trước kia, tài liệu này mang tên là Phương pháp Xác định Hạt Tiểu Phân trong Tiêm và Dung Dịch Nhỏ Mắt, tập trung chủ yếu vào việc kiểm định và yêu cầu thiết bị cho Đếm hạt bằng phương pháp chắn sáng và độ biến thiên của Đếm hạt bằng Phương pháp kính hiển vi

Tuy nhiên, với sự phát triển của Phương pháp Hình Ảnh Lưu Động và các dung dịch protein điều trị mới, phạm vi của tài liệu đã được mở rộng. Những thay đổi này giúp cung cấp một phương pháp quý giá, bổ sung thông tin hình thái hạt một cách đầy đủ hơn. Kiến thức chi tiết về loại hạt này giúp xác định nguồn gốc ô nhiễm và đề xuất các biện pháp khắc phục hiệu quả, đặc biệt nếu chúng ở mức độ không mong muốn.

Tài liệu đã được chia thành bốn phần cốt lõi:

• USP <1788> Phương pháp Xác định Hạt Tiểu Phân Không Nhìn Thấy.
  • <1788.1> Đếm hạt bằng phương pháp chắn sáng (Light Obscuration Particle Count Test).
  • <1788.2> Đếm hạt bằng Phương pháp kính hiển vi (Microscopic Particle Count Test)
  • <1788.3> Đếm hạt bằng Phương pháp Hình Ảnh Lưu Động (Flow Imaging).

Trong mỗi phần phụ của tài liệu, ba công nghệ chính được thảo luận: Đếm hạt bằng phương pháp chắn sáng (LO) vẫn là phương pháp tiêu chuẩn đầu tiên theo các chương chuẩn USP. Trong trường hợp dung dịch không thể kiểm tra bằng LO do độ trong suốt hoặc độ nhớt, Phương pháp Kính Hiển Vi (MM) nên được áp dụng. Phương pháp Hình Ảnh Lưu Động (FI) cung cấp một giải pháp thay thế ưu việt, với khả năng phân tích sợi hữu ích.

Sản phẩm tiêm dược phẩm hiện nay đa dạng về hình thức. Đối với mỗi loại, việc đánh giá thành phần không tan về mức độ ô nhiễm là cần thiết, gây ra các thách thức trong việc lấy mẫu và phương pháp kiểm tra cho các loại khác nhau như dung dịch lơ lửng, dung dịch thuốc rắn lơ lửng, và hỗn hợp, cũng như những loại có trọng lượng phân tử lớn, ảnh hưởng đến kết quả đo lường bằng phương pháp LO truyền thống. Bên cạnh đó, các phụ gia sử dụng trong công thức điều trị với các hợp chất tăng cường hỗ trợ cho thành phần hoạt động, có kích thước ≥ 2 µm, cũng cần được đánh giá kỹ lưỡng. Các dung dịch nhỏ mắt hiện cũng yêu cầu phải đáp ứng tiêu chuẩn ≥ 50 µm cho hạt tiểu phân, và việc lựa chọn thiết bị nên đảm bảo có khả năng phát hiện kích thước này.

Trong quá trình phát triển sản phẩm, khuyến nghị tạo lập một cơ sở dữ liệu hoặc thư viện về các đặc tính của chất ô nhiễm và nguồn gốc của chúng. Không nên sử dụng một kỹ thuật đơn lẻ khi xác định thư viện này, vì có thể bỏ sót các thông số có thể chứng tỏ là quý giá trong quá trình sản xuất. Nghiên cứu này cũng sẽ tạo cơ sở cho việc theo dõi thay đổi mức ô nhiễm hoặc phân phối hạt tiểu phân để phản ứng. Dữ liệu thay thế cho hạt tiểu phân trong dung dịch có thể được tạo ra bằng các kỹ thuật như phổ học, phân tích nguyên tố và kính hiển vi điện tử.

Ứng dụng của phương pháp

Dưới đây là so sánh giữa các kỹ thuật kiểm tra khác nhau cùng với các hạn chế của các kỹ thuật được áp dụng.

Hình ảnh dưới đây được cung cấp trong tiêu chuẩn, cho thấy phạm vi kích thước của mỗi yêu cầu kiểm tra cùng với ranh giới vùng có thể nhìn thấy cho các kiểm nghiệm.

Giới hạn số lượng tiểu phân

Các giới hạn cho USP <788> về Tiểu Phân trong Tiêm Tĩnh Mạch được xác định ở kích thước ≥ 10 µm và ≥ 25 µm và các giới hạn này không thay đổi từ giữa những năm 1990, là kết quả của việc xác định độ chính xác của giới hạn nồng độ cao nhất LO.

Giới hạn cho USP <789> Tiểu Phân trong Dung Dịch Nhỏ Mắt cũng áp dụng các ngưỡng kích thước ≥ 10 µm và ≥ 25 µm và gần đây đã thêm yêu cầu kích thước ≥ 50 µm.

Đối với các bình tiêm tĩnh mạch có dung tích nhỏ (SVI) (≤ 100 ml), các giới hạn được quy định cho tổng số tiểu phân trên mỗi thể tích bình. Ban đầu, người ta thấy rằng bình nhỏ nhất tiêu chuẩn là 2 ml, và do đó tổng lượng tiểu phân trên mỗi bình được thiết lập.

Đối với các bình tiêm tĩnh mạch có dung tích lớn (LVI) (> 100 ml), tổng tiểu phân được tính trên mỗi mililít, là kết quả của việc cung cấp lượng lớn hơn trong thời gian dài hơn.

LƯU Ý:

a. Các giới hạn cho <787> được kết hợp để vượt quá cả ngưỡng kích thước ≥ 10 µm và ≥ 25 µm.

b. Chưa thiết lập giới hạn cho dữ liệu FI, cũng như không áp dụng giới hạn cho dữ liệu ≥ 2 µm.

c. Cần lưu giữ hồ sơ mẫu cho tất cả dữ liệu các kích thước trong phạm vi kiểm tra, và thực hiện phân tích xu hướng để xác định liệu sản phẩm hoặc quy trình có nằm trong mức kiểm soát chấp nhận được hay không.

d. Giới hạn áp dụng cho toàn bộ thời hạn sử dụng sản phẩm và không nên bị ảnh hưởng bởi sự ổn định. Bảng trên dựa trên một mẫu được trích xuất từ tổng số lượng sản xuất đại diện cho lô hàng/mẻ hàng.

Trước đây, một khối lượng mẫu đơn lẻ tối thiểu ≥ 5 ml đã được thiết lập. Kỹ thuật lấy mẫu trong thiết bị Đếm hạt bằng phương pháp chắn sáng (Light Obscuration Particle Count Test) có sẵn vào thời điểm đó tương đối thô sơ và khối lượng mẫu lớn hơn mang lại kết quả tin cậy thống kê cao hơn. Thiết bị hiện đại cho phép sử dụng lượng mẫu đơn lẻ nhỏ hơn nhiều

Xem xét về Hiệu Chuẩn

Các thiết bị và phương pháp nên được hiệu chuẩn và thẩm định bằng dung dịch chuẩn về kích thước và số lượng hạt (NIST hoặc các cơ quan chứng nhận khác). Cần chú ý trong quá trình chuẩn bị dung dịch kiểm tra hiệu chuẩn/phù hợp để đảm bảo sự pha trộn đều và tránh tình trạng kết tụ của các hạt lơ lửng. Việc hiệu chuẩn cần xem xét toàn bộ phạm vi đo lường, và nếu cần, dữ liệu bổ sung chứng minh sự tuân thủ trong việc đo kích thước.

Xem xét về thẩm định

Phương pháp kiểm tra trong <788> đã chứng minh là một phép đo chất lượng đáng tin cậy trong nhiều năm đối với những dung dịch tiêm tĩnh mạch sạch và có độ nhớt thấp. Chuẩn mực sử dụng cụm từ 'giống như nước'. Tuy nhiên, đối với những dung dịch không thuộc mô tả 'giống như nước', có thể cần thêm các thử nghiệm và một chiến lược thay thế được hình thành như một phần của việc đặc tả tổng thể sản phẩm và các chất ô nhiễm hạt của nó.

Chi tiết về yêu cầu thẩm định của hệ thống thiết bị Quan Sát Quang Học được xem xét trong <1788.1> Đếm hạt bằng phương pháp chắn sáng để xác định tiểu phân không nhìn thấy. Có các yêu cầu bổ sung áp dụng cho tất cả các phương pháp kiểm tra được mô tả riêng biệt trong các phần bổ sung.

• Đặc trưng. Khả năng của một phương pháp xác định sự phân biệt giữa các loại hạt. Quan Sát Quang Học (LO) và Phép Đo Vi Mô (MM) đều có độ đặc trưng thấp, mặc dù hạt được thu giữ trên một nền lọc có thể cho phép phân tích phụ.

• Khôi Phục. Thách thức để chứng minh khả năng của một kỹ thuật phát hiện hạt có chỉ số khúc xạ khác. Thông tin này sẽ cho phép mô tả một phương pháp ngoài yêu cầu kiểm tra chuẩn và bổ sung vào thư viện đặc tả.

• Tuyến tính và Phạm Vi. Kiểm tra để xác định phản ứng của hệ thống ở các nồng độ đã biết trong phạm vi hoạt động quy định và đến giới hạn trùng hợp 10% của nồng độ tối đa chứng minh sự tuyến tính của thiết bị đã chọn. Thông tin này có sẵn từ các nhà cung cấp.

• Độ chính xác. Có hai biến số trong độ chính xác cho việc đếm hạt: kích thước của hạt và nồng độ hạt trong dung dịch. Các biến số này và các yếu tố khác, như tốc độ dòng chảy và thể tích

• Độ lặp lại. Tính lặp lại của các thử nghiệm. Điều này được chứng minh như đồng nhất của phép đo hoặc trong quá trình kiểm tra thường xuyên (chịu ảnh hưởng của sự biến đổi trong quá trình trộn) hoặc đủ điều kiện của thử nghiệm chuẩn hạt.

• Giới Hạn Phát Hiện. Đề cập đến khả năng của hệ thống phân biệt một hạt đơn lẻ so với nền của thành phần môi trường và nhiễu điện tử.

• Độ Mạnh. Khả năng của hệ thống tổng thể phản ứng với sự thay đổi. Phép Đo Vi Mô rất phụ thuộc vào đầu vào của người vận hành.

Thực hành lấy mẫu tốt

Khi chọn các mẫu phù hợp từ tổng số lượng, cần kiểm tra các bình cụ thể. Có một số phương pháp được sử dụng cho việc lấy mẫu, và trong mỗi trường hợp, cần cẩn thận để không có chất ô nhiễm vào mẫu

Mọi công tác chuẩn bị mẫu và kiểm tra nên được thực hiện trong một môi trường kiểm soát để giảm ảnh hưởng từ hạt bên ngoài, lý tưởng nhất là dưới điều kiện dòng không khí lọc, một chiều. Tất cả bao bì phụ nên loại bỏ ngoài khu vực kiểm tra, và nơi có việc tổng hợp mẫu, cần phải chú ý cực kỳ cẩn thận dụng cụ thủy tinh phải sạch sẽ. Việc làm sạch dụng cụ thủy tinh nên đạt kết quả không gây ảnh hưởng đến kết quả kiểm tra tổng thể, và lý tưởng nhất là đáp ứng các yêu cầu kiểm tra "mẫu trắng".

Số lượng mẫu sản phẩm được sử dụng là chức năng của thể tích mẫu cung cấp. Các phương pháp lấy mẫu sau đây có sẵn cho người dùng:

• Lấy Mẫu Trực Tiếp. Thể tích bình chứa > 100 ml có thể được lấy mẫu trực tiếp từ bình và kết quả so sánh với tiêu chuẩn trên mỗi ml. Thể tích mẫu > 25 ml, có thể được lấy mẫu riêng lẻ từ bình và kết quả trung bình trên mỗi bình, theo yêu cầu tiêu chuẩn SVI.

• Tổng Hợp. Nội dung của các bình chứa khi không đủ thể tích mẫu đơn lẻ có thể được tổng hợp bằng cách đổ trực tiếp nội dung vào dụng cụ thủy tinh sạch và lấy mẫu từ tổng số hợp nhất.

• Tái Tạo. Các sản phẩm lyophilized phải được tái tạo theo phương pháp quy định cho việc sử dụng bình thường với dung môi pha loãng được cung cấp hoặc nước không hạt. Nếu cần tổng hợp, các mẫu nên được tái tạo trước rồi sau đó mới tổng hợp.

• Pha Loãng. Trong trường hợp kiểm tra bằng LO hoặc FI được thực hiện và mẫu không đáp ứng yêu cầu về thể tích mẫu, màu sắc hoặc độ nhớt để kiểm tra phù hợp, thì việc pha loãng bằng nước không hạt có thể được thực hiện. Hệ số pha loãng phải được biết và kết hợp vào kết quả.

Việc trộn mẫu để đảm bảo các hạt lắng xuống được tái nhập vào dung dịch nên được thực hiện bằng cách lắc nhẹ, xoay hoặc lăn. Cần tránh tạo bọt hoặc tiếp xúc với các chất ô nhiễm bổ sung, có thể làm hỏng các thành phần dễ vỡ của dung dịch. Đồng nhất của dữ liệu kiểm tra sẽ chứng minh hiệu quả của sự hòa quyện. Để khử khí mẫu, có thể sử dụng các phương pháp như âm thanh hóa, để đứng, hoặc chân không.

Phần <1788.1> trong tài liệu chính <1788> bao gồm các khía cạnh cụ thể về Đếm hạt bằng phương pháp chắn sáng (Light Obscuration Particle Count Test) và yêu cầu mẫu. Như đã đề cập trước đó, LO là phương pháp ưu tiên, chính để đo lường tiểu phân trong các dung dịch dược phẩm.

Công nghệ của LO là một tia laser được hướng vào một cảm biến ánh sáng. Phương pháp này sử dụng ánh sáng để phân biệt và đo kích thước của các hạt bằng cách đo sự giảm thiểu của ánh sáng khi các hạt đi qua một cửa sổ quang học. Các hạt được giữ trong dung dịch lỏng được dẫn qua hệ thống quang học của laser thông qua một ống capillary hẹp. Khi các hạt di chuyển qua chùm tia laser, chúng tạo ra một bóng đổ trên cảm biến ánh sáng. Sự giảm biên độ của ánh sáng trên mạch cảm biến tương ứng với kích thước tương đương của hạt. Việc hiệu chuẩn sẽ điều chỉnh kích thước hạt và phản ứng của cảm biến qua phạm vi kích thước của thiết bị.

Xác Minh Hiệu Năng

Hệ thống đếm tiểu phân trong dung dịch như APSS-2000 được hiệu chuẩn đầy đủ cho toàn bộ phạm vi nhạy cảm (từ 2 µm đến > 125 µm), và đề xuất hiệu chuẩn hàng năm để xác minh rằng không có sự thay đổi trong các tham số chính và không có sự ô nhiễm của quang học xảy ra, có thể ảnh hưởng đến độ chính xác.

Các thử nghiệm bổ sung để xác minh toàn bộ phạm vi biến số cũng được yêu cầu và tạo thành phần xác thực của hệ thống. Các thử nghiệm sau đây được đề xuất như một phần của USP<1788.1>:

• Độ Chính Xác Thể Tích Mẫu. Thử nghiệm này xác minh sự chính xác thể tích mẫu đo được. Thử nghiệm sử dụng nước không hạt ở trong một bình. Lượng nước đã biết bị loại bỏ bằng sự giảm trọng lượng giữa mỗi lần lấy mẫu.

• Tốc Độ Dòng Mẫu. Máy đếm hạt được hiệu chuẩn ở một tốc độ dòng cố định. APSS có thể hỗ trợ nhiều tốc độ dòng, nhưng mỗi tốc độ dòng đều có đường cong hiệu chuẩn riêng được cài đặt trong phần mềm. Xác minh tốc độ dòng được thực hiện bằng cách đo thời gian lấy mẫu của bơm tiêm với một lượng mẫu đã biết. Thể tích mẫu chia cho thời gian bằng tốc độ dòng.

• Hiệu Chuẩn. Hiệu chuẩn được thực hiện bằng chuẩn NIST có thể truy xuất được. Một thuật toán nội bộ điều chỉnh kích thước hạt để phù hợp với tín hiệu trong các mạch xác định kích thước. APSS 2000 tuân thủ "Phương Pháp Tự Động" cho việc hiệu chuẩn thiết bị.

• Độ Phân Giải Kích Thước Cảm Biến. Thử nghiệm này cho thấy khả năng của máy đếm hạt để phân biệt giữa các hạt có kích thước khác nhau và rằng phân phối tín hiệu không gây xung đột với kích thước lân cận. Sử dụng một dung dịch chứa các hạt 10 µm và xác định tỷ lệ đếm giữa các kênh. APSS 2000 tuân thủ "Phương Pháp Tự Động" cho độ phân giải của thiết bị.

• Độ Chính Xác Đếm Hạt. Một dung dịch chuẩn có kích thước và nồng độ đã biết được kiểm tra số lượng hạt trên mỗi đơn vị thể tích. Kết quả được xác minh so với các thông số kỹ thuật trên tiêu chuẩn có thể truy xuất được đi kèm.

Tác giả

Mark Hallworth Chuyên gia GMP Cấp Cao về Khoa Học Sống Bộ phận Khoa Học Đời Sống của PMS. Mark Hallworth là Quản lý Khu vực Khoa Học Sống của PMS. Ông đã giảng dạy cho các hội dược phẩm trên khắp châu Âu, châu Á và Hoa Kỳ về giám sát hạt không sinh học và tác động của việc xác thực những hệ thống này.